多重聚合酶链式反应

多重聚合酶链式反应，是指使用聚合酶链式反应同时扩增多个不同的 DNA 序列（就像在一个反应中一起执行许多单独的 PCR 反应一样）。 该过程在热循环仪中使用多个引物和温度介导的 DNA 聚合酶扩增样品中的 DNA。 必须优化所有引物对的引物设计，以便所有引物对在 PCR 期间可以在相同的退火温度下工作。

多重 PCR 于 1988 年首次被描述为一种检测肌营养不良蛋白基因缺失的方法。 它也被用于类固醇硫酸酯酶基因。 2008 年，多重 PCR 被用于分析微卫星和 SNP。 2020 年，设计了 RT-PCR 多重检测，将疾病与控制中心的多个基因靶标结合在一个反应中，以提高 SARS-CoV-2 诊断的分子检测可及性和通量。

多重 PCR 由单个 PCR 混合物中的多个引物组组成，以产生对不同 DNA 序列具有特异性的不同大小的扩增子。 通过同时针对多个序列，可以从单次测试运行中获得额外的信息，否则将需要数倍的试剂和更多的时间来执行。 必须优化每个引物组的退火温度以在单个反应中正常工作，并且扩增子大小（即它们的碱基对长度）应该足够不同以在通过凝胶电泳可视化时形成不同的条带。 或者，如果扩增子大小重叠，则可以使用用不同颜色荧光染料染色的引物来区分和可视化不同的扩增子。 用于 PCR 的商业多路复用试剂盒可供使用，并被许多法医实验室用来扩增降解的 DNA 样本。

多重 PCR 的一些应用包括：

• 病原体鉴定
• 高通量 SNP 基因分型
• 突变分析
• 基因缺失分析

• 模板定量
• 连锁分析
• RNA 检测
• 法医研究
• 饮食分析