苏木精-伊红染色
编辑苏木精和伊红染色(或苏木精和伊红染色或苏木精-伊红染色;通常缩写为苏木精-伊红染色或 HE 染色)是组织学中使用的主要组织染色剂之一。 它是医学诊断中使用最广泛的染色剂,通常是金标准。 例如,当病理学家查看疑似癌症的活组织检查时,组织切片很可能被 H&E 染色。
H&E 是两种组织学染色的组合:苏木精和伊红。 苏木精将细胞核染成紫蓝色,曙红将细胞外基质和细胞质染成粉红色,其他结构呈现不同的深浅、色调和这些颜色的组合。 因此,病理学家可以轻松区分细胞的核和细胞质部分,此外,染色的整体着色模式显示细胞的总体布局和分布,并提供组织样本结构的总体概览。 因此,模式识别,无论是专家人类本身还是通过帮助这些专家(数字病理学)的软件,都提供了组织学信息。
这种染色组合于 1876 年由 A. Wissowzky 首次引入。
使用
编辑苏木精华-伊红染色程序是组织学中的主要染色程序,部分原因是它可以快速完成,不昂贵,并且以显露大量显微解剖结构的方式对组织进行染色,并且可以使用 诊断广泛的组织病理学状况。 苏木精-伊红染色的结果并不过分依赖于用于固定组织的化学物质或实验室方案中的轻微不一致,这些因素有助于其在组织学中的常规使用。
苏木精华-伊红染色并不总能提供足够的对比度来区分所有组织、细胞结构或化学物质的分布,在这些情况下使用更具体的染色剂和方法。
申请方法
编辑H&E 程序中使用的苏木精溶液(配方)的配制方法有很多种,另外,制作苏木精-伊红染色玻片的实验室规程也有很多,其中一些可能特定于某个实验室 . 虽然没有标准程序,但按照惯例,结果相当一致,细胞核被染成蓝色,细胞质和细胞外基质被染成粉红色。 组织学实验室还可以针对特定病理学家调整染色量或染色类型。
在组织被收集(通常作为活检)并固定后,它们通常被脱水并包埋在熔化的石蜡中,得到的块被安装在切片机上并切成薄片。 切片贴在显微镜载玻片上,此时用溶剂去除蜡,附着在载玻片上的组织切片被再水化并准备好进行染色。 或者,苏木精-伊红染色是莫氏手术中最常用的染色剂,在这种手术中,组织通常被冷冻,在低温恒温器(一种切割冷冻组织的切片机)上切割,在酒精中固定,然后染色。
苏木精-伊红染色方法包括应用与金属盐或媒染剂混合的苏木精,通常随后在弱酸溶液中漂洗以去除多余的染色(分化),然后在弱碱性水中染蓝。 应用苏木精后,组织用曙红(最常见的是曙红 Y)复染。
结果
编辑苏木精主要将细胞核染成蓝色或深紫色,还有一些其他组织,如透明角质颗粒和钙化物质。 曙红将细胞质和一些其他结构(包括细胞外基质,例如胶原蛋白)染成多达五种粉红色。 嗜酸性(被曙红染色的物质)结构通常由细胞内或细胞外蛋白质组成。 路易体和马洛里体是嗜酸性结构的例子。 大部分细胞质呈嗜酸性并呈粉红色。 红细胞被染成深红色。
作用方式
编辑尽管苏木精的一种氧化形式苏木因是活性着色剂(当与媒染剂结合使用时),但该染料仍被称为苏木精。 苏木精与媒染剂(最常见的是铝明矾)结合使用时,通常被认为类似于碱性、带正电或阳离子染色剂。 伊红是一种阴离子(带负电荷)和酸性染料。 hemalum(铝离子和 hematein 的组合)对细胞核的染色通常是由于染料-金属复合物与 DNA 的结合,但从组织切片中提取 DNA 后可以获得细胞核染色。 该机制不同于碱性(阳离子)染料如硫堇或甲苯胺蓝的核染色。 碱性染料染色仅发生在酸性低于血红素的溶液中,并且可以通过预先对核酸进行化学或酶促提取来防止。
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