埃尔曼试剂
编辑埃尔曼试剂(5,5'-二硫双-(2-硝基苯甲酸)或 DTNB)是一种用于量化样品中硫醇基团数量或浓度的化学品。
准备
编辑通过将 2-硝基-5-氯苯甲醛氧化为羧酸,通过硫化钠引入硫醇,并通过氧化与碘偶联单体来制备该试剂。 今天,这种试剂很容易在市场上买到。
埃尔曼检验
编辑硫醇与该化合物反应,裂解二硫键生成 2-硝基-5-硫代苯甲酸酯 (TNB-),在中性和碱性 pH 值的水中电离为 TNB2- 二价阴离子。 该 TNB2- 离子呈黄色。
该反应是快速且化学计量的,添加一摩尔硫醇会释放一摩尔 TNB。 TNB2− 在分光光度计中通过测量可见光在 412 nm 处的吸光度进行量化,稀释缓冲溶液使用 14,150 M−1 cm−1 的消光系数,高盐溶液使用 13,700 M−1 cm−1 的系数 浓度,例如 6 M 盐酸胍或 8 M 尿素。
商业 DTNB 可能不完全纯净,因此可能需要重结晶以获得完全准确和可重现的结果。
埃尔曼试剂可用于测量纯溶液和生物样品(如血液)中的低分子量硫醇(如谷胱甘肽)。 它还可以测量蛋白质上硫醇基团的数量。
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