引物
编辑在分子生物学中,引物表示作为 DNA 复制酶(如 DNA 聚合酶)起始点的寡核苷酸。
DNA 聚合酶需要一个羟基作为其xxx个连接反应的起点。 引物通过其 3'-OH 末端提供合适的羟基功能。 引物可以由DNA和RNA组成。 RNA作为原核生物和真核生物复制的材料。 在原核生物中,灵长类酶,也称为 DnaG 蛋白,合成引物序列。 在真核生物中,DNA 聚合酶 α 具有引发酶功能。 真核细胞端粒上的DNA合成代表了一个特例,聚合酶端粒酶利用DNA的3'-OH端作为引物序列。 在原核生物中,复制过程中出现的引物被聚合酶 I 的 5'-3'-核酸外切酶活性或 RNase H 去除。 在真核细胞中,引物通过聚合酶 δ 的置换 DNA 合成和活瓣核酸内切酶的限制而被去除。 等位基因特异性寡核苷酸与特定的 SNP 结合。
DNA 的体外扩增也需要引物,例如聚合酶链反应 (PCR)、DNA 测序或逆转录。 在这里您可以使用引物来指定要扩增的特定 DNA 片段。
引物设计
编辑引物n的有目的的设计称为引物设计。 对于 PCR 方法,确定要扩增的 DNA 片段侧翼的核苷酸序列。
根据这些序列,现在通过亚磷酰胺合成产生匹配的引物序列。 引物代表与其“引物伙伴”相反的链。 用于 PCR 方法的引物长度通常为 18-30 个核苷酸。定制的错配引物也可用于通过 PCR 技术将靶向突变引入基因。 B. 在交换一个氨基酸。
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