X-gal
编辑摩尔质量408.6 g mol聚集态
牢牢
236 °C(分解)
溶于二甲基亚砜
危险
H和P短语H:302 312 332 P:301+330+331 302+352
X-gal,也称为 X-Gal,是一种人工糖苷和 β-半乳糖苷酶的显色底物。
属性
编辑β-半乳糖苷酶将 X-Gal 水解为半乳糖和5-溴-4-氯吲哚 (5-溴-4-氯-3-羟基吲哚)。5-溴-4-氯吲哚被空气中的氧气氧化成深蓝色染料 5,5'-二溴-4,4'-二氯靛蓝。
使用
编辑在生物化学中,X-Gal 用于定性测定 β-半乳糖苷酶活性。 相反,底物 邻硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷 (ONPG) 用于定量测定。
在分子生物学中,X-Gal 用于蓝白色选择。 在许多克隆载体中,在 β-半乳糖苷酶(α-片段)的氨基末端编码序列中有一个多克隆位点,外源 DNA,例如 B. 可以引入 PCR 片段。 这会打断 β-半乳糖苷酶的基因序列,并且该酶不再表达。 由此可见,X-Gal 不再分裂,因此不会形成蓝色染料。 转化后形成的菌落不会像空载体那样呈现蓝色,而是白色。
X-Gal 通常与 IPTG 结合使用(以诱导 lac 启动子,另请参见 lac 操纵子)以筛选蓝色菌落。 它还用于筛选真核细胞转染中的 β-半乳糖苷酶报告基因活性,以及检测免疫学和组织化学应用中的 β-半乳糖苷酶。
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