负染色法

在显微镜检查中，负染色是一种成熟的方法，通常用于诊断显微镜检查，用于对比薄样本和不透光的液体。 在这种技术中，背景被染色，实际标本未被触及，因此可见。 这与阳性染色形成对比，在阳性染色中，实际标本被染色。

对于明场显微镜，负染色通常使用黑色墨水液体（如苯胺黑和印度墨水）进行。 标本，例如铺在载玻片上的湿细菌培养物，与阴性染色混合并晾干。 当用显微镜观察时，细菌细胞，也许还有它们的孢子，在周围黑暗的背景下显得很亮。 已经开发出一种替代方法，使用普通防水记号笔来传递负染色。

在透射电子显微镜的情况下，电子的不透明度与原子序数有关，即质子数。 一些合适的负染色剂包括钼酸铵、乙酸双氧铀、甲酸双氧铀、磷钨酸、四氧化锇、铁氰化锇和金葡糖酸盐。 选择这些是因为它们强烈地散射电子并且也很好地吸附到生物物质上。 可以负染的结构比用光学显微镜研究的结构小得多。 在这里，该方法用于观察病毒、细菌、细菌鞭毛、生物膜结构和蛋白质或蛋白质聚集体，它们都具有低电子散射能力。 一些染色剂，例如四氧化锇和铁氰化锇，具有很强的化学活性。 作为强氧化剂，它们主要通过与不饱和碳-碳键反应来交联脂质，从而将生物膜固定在组织样本中并同时对其进行染色。

电子显微镜中负染色的选择可能非常重要。

对植物病毒进行的一项早期研究使用了一种病害植物的负染叶浸渍液，结果表明只有球形病毒带有一种染色，只有杆状病毒带有另一种染色。 经核实的结论是，这株植物受到了两种不同病毒的混合感染。 除非遵循严格的安全预防措施，否则不应在光学显微镜和电子显微镜水平上对传染性生物体进行染色法检测。 负载染色法通常是一种非常温和的制备方法，因此不会降低操作者感染的可能性。

负染色法透射电子显微镜也已成功用于研究和鉴定水性脂质聚集体，如层状脂质体 (le)、倒球形胶束 (M) 和倒六角 HII 圆柱 (H) 相。