基因组编辑

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基因组编辑或基因组手术,是对DNA进行靶向修饰的分子生物学技术的统称,包括植物、动物和人类的基因组。 所谓的设计核酸内切酶用于在复杂生物体的基因组中引入靶向变化。这些酶在预定的目标序列处切割双链DNA,造成双链断裂。双链断裂反过来激活细胞中的DNA修复过程,例如非同源末端连接(NHEJ)或同源修复,也称为同源定向修复(HDR)。虽然基因是使用NHEJ专门灭活的,但HDR可用于将定义的突变或整个DN...

基因组编辑

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基因组编辑或基因组手术,是对DNA进行靶向修饰的分子生物技术的统称,包括植物动物和人类的基因组。

作用方式

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所谓的设计核酸内切酶用于在复杂生物体的基因组中引入靶向变化。 这些酶在预定的目标序列处切割双链 DNA,造成双链断裂。 双链断裂反过来激活细胞中的 DNA 修复过程,例如非同源末端连接 (NHEJ) 或同源修复,也称为同源定向修复 (HDR)。 虽然基因是使用 NHEJ 专门灭活的,但 HDR 可用于将定义的突变或整个 DNA 片段定向插入基因组。

常用的设计核酸酶类别包括锌指核酸酶 (ZFN)、转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN)、CRISPR/Cas 方法、CRISPR/Cpf1 系统和大范围核酸酶(修饰的归巢核酸内切酶)。 在锌指核酸酶、TALEN 和大范围核酸酶中,对 DNA 的特异性识别是由特定的蛋白质部分进行的,而在 CRISPR 系统中,它是由特定的 RNA 介导的。

应用

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基因组编辑用于微生物(白色基因工程)、植物(绿色基因工程)、动物(红色基因工程)和人类(基因治疗)基因组的靶向改变。 基因组编辑可用于特异性破坏基因(基因敲除),在基因组中的特定位置引入基因(基因敲入),或纠正基因中的点突变。

碱基编辑

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基因组编辑的一种新的精确方法是改变DNA序列中的单个碱基(碱基编辑)。 无法再切割 DNA 的 Cas9 核酸酶的突变形式与脱氨酶结合。 这种融合蛋白能够与sgRNA特异性识别所需的DNA序列,并通过脱氨作用改变碱基。 在与胞苷脱氨酶融合的情况下,胞苷转化为尿嘧啶,通过 DNA 修复和复制被胸苷取代。 这会将碱基对 C-G 突变为 T-A。 或者,Cas9 可以与腺苷脱氨酶偶联,使腺苷转化为肌苷,在 DNA 修复和复制后被鸟苷取代。 在这种情况下,碱基对 A-T 被转换为 G-C。 碱基编辑效率在5%到50%之间。 因为 DNA 没有被切割,不需要的变化不太常见。所有 12 种可能的点突变都可以通过 prime 编辑实现。

基因组编辑

监管方面

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对于基因组编辑生物是否应归类为转基因生物 (GMO) 以及是否应因此应用适用于 GMO 的指南,目前尚无一致意见。 目前,农业中的可能应用,以及可想象的医学用途都处于前景。

植物育种

来自不同国家的专家建议,基因组编辑的植物只要不含有外来DNA,就等同于常规育种的植物。 这一观点考虑到这样一个事实,即基因组编辑植物通常与传统育种植物没有区别,而且它们也可以使用传统方法进行育种。

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词条目录
  1. 基因组编辑
  2. 作用方式
  3. 应用
  4. 碱基编辑
  5. 监管方面
  6. 植物育种

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