甲䐶

甲臜是具有通式 [R-N=N-C(R')=N-NH-R] 的化合物，形式上是甲臜 [H2NN=CHN=NH] 的衍生物，游离形式未知。

甲䐶染料是通过脱氢酶和还原酶还原四唑盐而获得的人工显色产物。 它们有多种颜色，从深蓝色到深红色再到橙色，具体取决于用作反应底物的原始四唑盐。

甲䐶是色彩鲜艳的化合物，具有以下结构特征：[-N=N-C(R)=N-NH-]，与偶氮 (-N=N-) 染料密切相关。 它们的结构于 1892 年由 von Pechmann 以及 Bamberger 和 Wheelwright 独立定义。 它们的深色和氧化还原化学源自它们富含氮的主链。

甲䐶具有高度的互变异构和构象灵活性。 由于主链中有两个交替的双键，甲臜可以以四种可能的异构形式存在：顺式、顺式（闭合形式）； syn, s-trans（开放形式）； 反，顺式； 和反，s-trans（线性形式）。

1,5-二取代甲臜可以两种互变异构体形式存在。 去质子化后，形成的阴离子 (3) 通过共振稳定。 甲臜与过渡金属离子（Cu2+、Co3+、Ni2+、Zn2+ 等）形成高度着色的络合物（螯合物）。

由于它们能够与强酸和强碱反应，甲臜可以被认为是两性的。

这些化合物的氧化导致它们转化为无色的四唑盐。 使用的各种氧化剂包括氧化汞、硝酸、亚硝酸异戊酯、N-溴代琥珀酰亚胺、高锰酸钾、四乙酸铅和次氯酸叔丁酯。 根据条件，四唑盐可以被还原形成四唑基或甲臜：

甲臜的合成有多种合成方法。

重氮化合物与醛腙的反应是生产甲臜最常见的方法之一。 腙是富含电子的化合物，在氮原子或碳原子上与重氮盐反应生成甲臜。 重氮盐通过置换氢与腙中的胺氮偶联，得到中间体，然后重排为甲臜。

另一种合成甲臜的形式是通过活性亚甲基化合物与重氮盐的反应。 重氮盐添加到活性亚甲基化合物中形成中间体偶氮化合物，然后添加第二种重氮盐（在更碱性的条件下），生成四苯，然后形成 3-取代的甲臜。

甲䐶也可以通过相应的肼的氧化来生产，通常通过肼基卤化物与适当的肼衍生物的反应来制备。 例如，甲酸乙酯或原甲酸酯在酸性条件下与两当量的苯肼反应生成 1,5-二苯基甲臜。 在碱性条件下，硝酸乙酯在亚甲基位置反应生成3-甲基-1,5-二苯基甲臜，也可由苯基偶氮乙烷与亚硝酸异戊酯反应得到。

此外，甲臜可以通过光化学分解或在碱性介质中抗坏血酸的影响下分解取代的四唑盐获得。

四唑盐及其甲臜产物广泛用于组织化学方法，尤其是比色活力测定。 这些程序基于线粒体脱氢酶还原四唑盐，线粒体脱氢酶在活细胞内携带：

最常用的四唑盐的主要例子包括：

• INT 或 2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-phenyl-2H-tetrazolium chloride，不溶于水。
• MTT 或 3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2, 5-二苯基-2H-四唑溴化物，不溶于水，用于 MTT 测定。
• XTT 或 2,3-bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide，它是水溶性的。
• MTS 或 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑，它是水溶性的，用于 MTS 测定 .

• TTC 或氯化四唑或氯化 2,3,5-三苯基-2H-四唑，它是水溶性的。
• NBT 用于诊断测试，特别是慢性肉芽肿病和其他吞噬细胞功能疾病。

当在细胞中通过酶促或通过与 NADH 或 NADPH 的直接反应进行还原时，经典的四唑盐 MTT 会变成蓝色至紫色，并可能形成不溶性沉淀物。 这些甲臜染料通常用于细胞增殖和毒性检测，例如 EpiDerm 和 EpiSkin 检测，因为它们只染色活的、代谢活跃的细胞。